Enzymy restrykcyjne- endonukleazy, rozpozn specyficzne sekwencje DNA. Te z róznych drobnoustrojuw rozpoznaj te same sekwenc to izischizomery. Enzymy poliendronowe –odczyt 4-8 zasad sekwencji w kazdym kierunku jest identyczny. Mogą ciąc tępo i lepko. Wektory dobry: unikalne miejsca cięcia dla kilku enz restryk, 2 markery bo wprowadz w 1 pozwala na odrózn czyli nastepuje insercyjna inaktywacja, zawierac silne promotory do zwiększenia ekspresji, być wysokokopiowy. Mięc miejsca ORI – inicjacji replikacji pBR-dwa markery Apr Tcr Rozcinanie w miejscu PST1 uinaktywuje oporność na ampicyline. (dna i pbr traw Pst1 ligazat4 łączy wysiew na te z Tc i posiew zorientow na te z Tc i Ap. Co nie wyrosło na Ap a jest na Tc to właśnie rekombinowane pUC- opornośc na Ap, fragment genu promotor i sekwencje N końcową w lacZ enzymu B-galaktozydazy z polilinker w którym jest wiele sekwencji dla enzym restryk . Do klonowania szczepy e coli bez N- końcowej czesci. Mają w chromosomie c-koń. Jeśli dojdzie do wprowadz Dna w polilinker to nie będzie syntezy B- galaktozydazy jeśli nie transform to Będzie. Chodowla na X-gal i induktor IPTG sprawia ze nie zrekomb nieb zrekomb bial.